Effect of triamcinolone in keloids morphological changes and cell apoptosis / Efeito da triancinolona na apoptose celular e nas alterações morfológicas em queloides

OBJECTIVE: To assess the effects of injectable triamcinolone on keloid scars length, height and thickness, and on the number of cells undergoing apoptosis. METHODS: This study consists in a prospective, controlled, randomized, single-blinded clinical trial, conducted with fifteen patients with ear keloids divided into two groups: group 1 - seven patients undergoing keloid excisions, and group 2 - eight patients undergoing keloid excisions after three sessions of infiltration with one ml of Triamcinolone hexacetonide (20mg/ml) with three week intervals between them and between the last session and surgery. The two groups were homogeneous regarding age, gender and evolution of the keloid scar. The keloid scars of patients in group 2 were measured for the length, height and thickness before triamcinolone injection and before surgery. A blinded observer performed morphological detailing and quantification of cells in hematoxylin-eosin-stained surgical specimens. An apoptotic index was created. RESULTS:The apoptotic index in group 1 was 56.82, and in group 2, 68.55, showing no significant difference as for apoptosis (p=0.0971). The reduction in keloid dimensions in Group 2 was 10.12% in length (p=0.6598), 11.94% in height (p=0.4981) and 15.62% in thickness (p=0.4027). CONCLUSION: This study concluded that the infiltration of triamcinolone in keloid scars did not increase the number of apoptosit and did not reduce keloids' size, length, height or thickness.

OBJETIVO: Comparar o efeito da triancinolona injetável em cicatrizes queloidianas quanto ao número de células em apoptose e avaliar o efeito da triancinolona quanto às alterações no comprimento, altura e espessura dessas cicatrizes. MÉTODOS:Estudo clínico longitudinal, prospectivo, controlado, aleatorizado, unicego, com 15 pacientes portadores de queloides de orelha distribuídos em dois grupos: grupo 1, com sete pacientes submetidos apenas às exéreses dos queloides; e grupo 2, com oito pacientes submetidos às exéreses das lesões após três sessões de infiltração de 1ml de hexacetonida de triancinolona (20mg/mL), com intervalos de três semanas entre elas, assim como entre a última sessão e a operação. Os dois grupos foram homogêneos quanto à: idade (p=0,867), sexo (p=0,782) e tempo de evolução da cicatriz queloidiana (p=0,779). As cicatrizes queloidianas dos pacientes do grupo 2 foram medidas quanto ao comprimento, altura e espessura antes da injeção da triancinolona e antes do procedimento cirúrgico. Um observador mascarado realizou detalhamento morfológico e quantificação das células nas peças cirúrgicas, coradas com HE. Foi criado um índice apoptótico. RESULTADOS:Os dois grupos foram homogêneos quanto à: idade (p=0,867), sexo (p=0,782) e tempo de evolução da cicatriz queloidiana (p=0,779). o índice apoptótico no grupo 1 foi 56,82 e no grupo 2, 68,55, sem diferença (p=0,0971). As reduções nas dimensões dos queloides dos grupos 2 foram 10,12% para o comprimento (p=0,6598), 11,94% para a altura (p=0,4981) e 15,62% para a espessura (p=0,4027). CONCLUSÃO:A infiltração de triancinolona nas cicatrizes queloidianas não aumentou o número de apoptoses e não houve redução das dimensões, comprimento, altura e espessura dos queloides.

Apoptosis and expression of argyrophilic nucleolus organizer regions in epithelial neoplasms of the larynx / Apoptose e expressão de regiões argirófilas organizadoras de nucléolos em neoplasias epiteliais da laringe

INTRODUCTION: Occurrence of apoptosis and expression of proliferative markers are powerful tools to establish a prognosis in the follow-up of cancer. OBJECTIVE: To evaluate the growth fraction in papillomas and laryngeal squamous cell carcinomas with three degrees of differentiation through apoptosis and the expression of nucleolus organizer regions. METHODS: Retrospective study from which paraffin material was submitted to microtomy and hematoxylin-eosin and silver staining. Stained slides were used to quantify the apoptotic index and the number of nucleolus organizer regions by morphometry. RESULTS: Apoptosis was significantly more frequent in well differentiated carcinomas and in papillomas, and a higher growth fraction of expressed nucleolus organizer regions and cells that expressed a greater than average number of nucleolus organizer regions were more frequently noted in undifferentiated carcinomas. CONCLUSIONS: Thus, it was possible to verify that a high apoptotic index was associated with a lower chance of tumor differentiation in carcinomas, while a greater number of total nucleolus organizer regions, cells expressing nucleolus organizer regions above average and a higher growth fraction were associated with greater likelihood of abnormal cell proliferation and increased tumor differentiation. .

INTRODUÇÃO: A ocorrência de apoptose e a expressão de marcadores proliferativos são ferramentas poderosas no estabelecimento do prognóstico do câncer. OBJETIVO: Avaliar a fração de crescimento de papilomas e carcinomas laríngeos de células escamosas, com três graus de diferenciação, através da apoptose e expressão de regiões organizadoras de nucléolo. MÉTODO: Estudo retrospectivo, cujo material em blocado em parafina foi submetido à microtomia e coloração em hematoxilina-eosina, e pela prata. As lâminas coradas foram utilizadas para quantificar o índice apoptótico e o número de regiões organizadoras de nucléolo (NORs) através da morfometria. RESULTADOS: A apoptose foi significativamente mais frequente em carcinomas bem diferenciados e em papilomas; enquanto que uma maior fração de crescimento, de NORs expressos e de células que expressaram maior número de NORs, foram mais frequentes nos carcinomas indiferenciados. CONCLUSÕES: Foi possível verificar que o índice apoptótico elevado indica menores chances de diferenciação tumoral nos carcinomas, enquanto que um maior número de NORs totais e células expressando NORs acima da média, e uma maior fração de crescimento, determinam maiores chances de proliferação celular anormal e maior diferenciação tumoral. .

Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis / Apoptosis in experimental infection with Ehrlichia canis in domestic dogs

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.

Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.

Apoptose em pólipos nasais eosinofílicos submetidos in vitro ao tratamento com mitomicina C / Apoptosis in eosinophilic nasal polyps treated in vitro with mitomycin C

A etiopatogênese da polipose nasal eosinofílica ainda não foi esclarecida. Os eosinófilos constituem as principais células do infiltrado inflamatório e estão relacionados com a perpetuação do processo inflamatório na rinossinusite crônica com pólipos nasais. OBJETIVO: Avaliar a ação in vitro da mitomicina no índice apoptótico de pólipos nasais eosinofílicos. MATERIAL E MÉTODO: Estudo prospectivo experimental autopareado com amostra de biópsia de 15 pacientes com polipose nasal eosinofílica. Cada fragmento foi dividido em dois grupos. No grupo experimental aplicou-se mitomicina por cinco minutos, na dosagem de 400 µg/ml. O grupo controle foi submetido às mesmas manipulações, mas utilizando-se somente meio de cultura. Os fragmentos contidos nos dois primeiros compartimentos, controle e experimento, foram imediatamente submetidas ao preparo para histopatologia. O outro par de amostra, contendo controle e experimento, foi incubado por 12 horas. Após 12 horas, os fragmentos foram retirados para exame histopatológico. O índice apoptótico foi determinado pela morfometria na coloração hematoxilina-eosina e pela análise da fragmentação do DNA. RESULTADO: A comparação do dois grupos demonstrou diferença significativa (p < 0,001) no índice apoptótico das culturas incubadas por 12 horas. CONCLUSÃO: A mitomicina induz in vitro o aumento do índice apoptótico dos eosinófilos dos pólipos nasais eosinofílicos.

The etiopathogenesis of eosinophilic nasal polyps is yet to be explained. Eosinophils are key components in the inflammatory infiltrate and are related to the perpetuation of the inflammatory process in chronic rhinosinusitis with nasal polyps. OBJECTIVE: This paper aims to evaluate the in vitro action of mitomycin upon the apoptotic index of nasal polyps. MATERIALS AND METHODS: This is a self-paired prospective experimental study using biopsy fragments from 15 patients with eosinophilic nasal polyps. Biopsy fragments were divided into two groups. In the case group, the fragments were treated with 400 µg/ml of mitomycin for five minutes. The control group fragments were treated with culture medium. The pair of fragments contained in the two first compartments - control and case - were immediately sent to the histopathologist. The other pair of samples containing control and case fragments was incubated for 12 hours. The fragments were then taken to the histopathologist for testing. The apoptotic index was determined by the morphometry in hematoxylin and eosin staining and DNA fragmentation analysis (TUNEL reaction). RESULTS: The comparison between the two groups showed a statistically significant difference (p < 0,001) in the apoptotic index of the 12-hour incubated cultures. CONCLUSION: Mitomycin acts in vitro upon the eosinophilic nasal polyps inducing the rise of the eosinophilic apoptotic index.

Lesão de isquemia e reperfusão após clampagem contínua ou intermitente do pedículo hepático em coelhos / Ischemia/reperfusion injury after continuous or intermittent hepatic pedicle clamping in rabbits

RACIONAL: O controle do sangramento na hepatectomia é um desafio para os cirurgiões. A clampagem do pedículo hepático é manobra cirúrgica que pode promover redução do sangramento, mas provoca isquemia hepatocelular. Isso, junto com a reperfusão depois que a clampagem termina, leva à lesão de isquemia e reperfusão. OBJETIVO: Examinar os efeitos da lesão de isquemia e reperfusão no fígado após clampagem contínua e intermitente do pedículo hepático, usando a quantificação de apoptose como ferramenta. MÉTODO: Vinte coelhos New Zealand foram divididos em grupos 1 (controle), 2 (60 minutos de isquemia contínua) e 3 (60 minutos de isquemia intermitente alternando 12 minutos de isquemia e três minutos de reperfusão). Biópsias hepáticas foram colhidas antes e ao fim da isquemia e após seis horas de reperfusão, quando os animais eram sacrificados. Os fragmentos obtidos foram submetidos à análise histológica e histoquímica (reação de Tunel). Campos microscópicos foram analisados para caracterização e quantificação de apoptose. RESULTADOS: A isquemia levou à elevação do índice apoptótico em ambos os grupos experimentais em relação aos controles, mas similar entre eles. Depois da reperfusão os índices voltaram aos valores iniciais. CONCLUSÃO: A clampagem do pedículo hepático, tanto contínua quanto intermitente, induz a apoptose em células hepáticas de modo igual.

BACKGROUND : The control of bleeding in hepatectomy is a challenge for surgeons. The hepatic pedicle clamping is a surgical maneuver that can provide reduction in bleeding, but it provokes a hepatocellular suffering. This, along with reperfusion after the clamping finishes, leads to an injury known as ischemia/reperfusion injury. AIM: To examine the effects of the ischemia/reperfusion injury on the liver after continuous and intermittent hepatic pedicle clamping in an animal model, using the quantification of apoptosis for evaluation. METHOD: Twenty New Zealand rabbits were assigned to groups 1 (control), 2 (60 minutes of continuous ischemia) and 3 (60 minutes of intermittent ischemia alternating 12 minutes of ischemia and three minutes of reperfusion). Liver biopsies were collected before ischemia, at its end and after six hours of reperfusion, when the animals were killed. The liver fragments were subjected to histological analysis (paraffinization and hematoxilin-eosin staining) and histochemical (Tunel reaction). Microscope fields of view were scanned for characterization and quantification of apoptosis. RESULTS : Ischemia led to an increased apoptotic index in both experimental groups in comparison to controls, but similarly between them. After the reperfusion, the indexes returned to baseline values. CONCLUSION: Clamping of the hepatic pedicle, either continuous or intermittent, induces apoptosis in liver cells in a similar way.

Histopathology of Fasciola hepatica infection in Meriones unguiculatus

Três grupos de 60 Meriones unguiculatus foram inoculados, respectivamente, com 3, 5 e 8metacercárias de Fasciola hepatica e dez animais permaneceram como controle. Com intervalo de dez dias, seis animais do grupo infectado e um animal do grupo controle foram eutanasiados,sendo coletadas amostras para a histopatologia dos órgãos internos. Foram observadas áreas hemorrágicas, focos de necrose e fibrose no fígado, no rim direito e em órgãos internos contidosnas cavidades torácica e abdominal em 20,6por cento dos animais infectados, independentemente do número de metacercáreas. O fígado foi o órgão mais lesado, indicando o tropismo que o parasito apresenta durante seu desenvolvimento. Foram observadas alterações no espaço porta-hepático,dilatação do ducto biliar e de ramos da artéria hepática, rompimento de ramos da veia hepática e hemorragia periportal. Foram recuperados parasitos e ovos de F. hepatica aderidos à parede interna do ducto biliar. A análise histopatológica do fígado e do linfonodo mesentérico mostrou a presençade hemossiderose e de reação inflamatória macrofagocitária. No fígado, pulmões, diafragma, baço,linfonodos mesentéricos, rins, pâncreas e intestino delgado, havia infiltrado inflamatório misto formado por polimorfonucleares e mononucleares, áreas hemorrágicas, e focos de necrose e fibrose. Os resultados indicam que M. unguiculatus mantém a infecção por longos períodos, permitindo também o desenvolvimento do parasito em diferentes órgãos.

Histomorfometria, apoptose e proliferação celular em neoplasias intraepiteliais do colo uterino / Histomorphometry, apoptosis and cell proliferation in cervical intraepithelial neoplasia

INTRODUÇÃO: As displasias do colo uterino são precursoras do carcinoma de células escamosas. Mutações induzidas por carcinógenos correlacionam-se com alterações proliferativas. O acúmulo dessas mutações e o descontrole da homeostase genômica permitem mudanças na expressão de determinados genes e geram desequilíbrios na proliferação celular e na apoptose. Marcadores imuno-histoquímicos de proliferação celular, de apoptose e de sobrevivência celular em lesões intraepiteliais cervicais ainda necessitam de estudo morfométricos para definir seus papéis na evolução das displasias ao carcinoma invasivo. OBJETIVOS: Para melhor entender os processos de proliferação celular, apoptose e renovação epitelial nessas lesões, foram realizadas histomorfometria para mitose e apoptose e reações imuno-histoquímicas das proteínas Bax, Bcl-2 e Ki-67 (reatividade, localização e intensidade) em biópsias cervicais. MÉTODOS: As amostras foram divididas em quatro grupos: 1. cervicite (n = 20); 2. displasia leve (n = 20); 3. displasia moderada (n = 20); 4. displasia acentuada (n = 20). RESULTADOS: Foram verificadas intensa proliferação celular e apoptose nas lesões de alto grau e ampla, intensa e difusa imunomarcação para Ki-67 e Bax. Esses achados foram encontrados de maneira discreta ou nula nos grupos cervicite e displasia leve. A marcação para Bcl-2 foi mais intensa nas lesões de alto grau, tendo sido discreta nas demais. A ampla marcação imuno-histoquímica de Ki-67 e Bax é sugestiva de elevado grau de renovação celular, o qual também é sustentado pela histomorfometria. A expressão do Bcl-2 aumenta com a gravidade da displasia. CONCLUSÃO: Esses achados indicam que o processo pré-neoplásico é dinâmico, com apoptose e mitose ocorrendo concomitantemente.

INTRODUCTION: Cervical dysplasias are precursor to squamous cell carcinoma of the uterine cervix. Carcinogen induced mutations correlate with proliferative alterations. Accumulation of such mutations and unbalance of genomic homeostasis induce changes in certain genes as well as affect cell proliferation and apoptosis. Immunohistochemical markers of cellular proliferation, apoptosis and cell survival in cervical intraepithelial lesions still require morphometric studies in order to define their role in the development of dysplasias caused by invasive carcinoma. OBJECTIVES: In order to better understand the processes of cellular proliferation, apoptosis and epithelial turn over in such precursory lesions, histomorphometric evaluation for mitosis and apoptosis as well as immunohistochemical reactions for Bax, Bcl-2 and Ki-67 proteins (reactivity, localization and intensity) were carried out in cervical biopsies. METHODS: Samples were split into four groups: 1. cervicitis (n = 20); 2. light dysplasia (n = 20); 3. moderate dysplasia (n = 20); 4. severe dysplasia (n = 20). RESULTS: Intense proliferation and apoptosis were observed in lesions with high, extensive, intense, and diffuse Ki-67 and Bax immunolabeling. Proliferation and apoptosis were mild or null in groups 1 and 2. Bcl-2 immunolabeling was more intense in high degree lesions and mild in the other groups. Extensive Ki-67 and Bax immunolabeling suggests an increased cellular turn over, which was also corroborated by histomorphometry. The more severe the dysplasia is the higher Bcl-2 expression. CONCLUSION: These data indicate that the pre-neoplastic process is dynamic and is concomitant with apoptosis and mitosis.

Effect of finasteride on serum prostate-specific antigen (PSA) and on prostate of hamster Mesocricetus auratus (hMa) / Efeito da finasterida no antígeno prostático específico (PSA) sérico e na próstata do hamster Mesocricetus auratus (hMa)

PURPOSE: Evaluate the effects of finasteride on the serum PSA and on the prostate of hamster-Mesocricetus auratus(hMa). METHODS: Twenty hMa male adults were split in groups control and experimental (n=10). Animals of the experimental group received 7.14ng/mL of finasteride, subcutaneously (SC) on the back three times per week, during 90 days. The finasteride dose was equivalent to 5.0mg administered to a 70kg man. At the end of the experiment the mean age for the animals in the control group was 15.2±1.13months and for the experimental group was 17.7±0.67 months. There was a statistically significant difference between mean ages of both groups (t value=5.98; p=0.001). The animals of the control group weighted 129.0±18.8g and the experimental group weighted 145.0±15.5g, t=1.88 e p=0.0514. The serum PSA was assessed through ELISA method. Prostates of those animals were collected and processed to histology and morphometry: the diameter of the acinous glands and the acinous epithelium, apoptosis, AgNORs and cellularity were assessed in both groups. RESULTS: Serum PSA decreased in the experimental group, 0.003ng/mL versus 0.763ng/mL, H= 7.982 e p= 0.0047. Decrease in the acinous area occurred in animals that received finasteride, 238.000±24.600 μm² versus 398.600±55.320 μm²; t= 2.653; p= 0.0122. A remarkable decrease in the area of the acinous epithelium occurred in the animals that received finasteride, 111.900±12.820 μm² versus 160.400±18.430 μm² t= 2.162; p= 0.0361. AgNORs were less expressed in finasteride treated animals, 2.846±0.877 versus 3.68 ±1.07 argyrophilic clusters for μm², p= < 0.0001. Apoptosis was more intense in the experimental group, 53.62±1.389 than in controls, 14.76 ± 2.137, p= 0.0408. However, there was no statistical difference in the cellularity between both groups, 74.75±5.5 cells, in controls versus 65.07±13.24, in treated animals, p=0.5105. CONCLUSIONS: Use of finasteride decreased serum ...

OBJETIVO: Avaliar o efeito da finasterida no PSA sérico e na próstata do hamster-Mesocricetus auratus (hMa). MÉTODOS: 20 hMa adultos machos foram divididos em grupos de 10 animais. No experimento foram administrados 7,14 ng/mL de finasterida, subcutâneo (SC), no dorso, três vezes por semana, por 90 dias, dose equivalente a 5,0 mg usada em homem de 70Kg. Ao final da pesquisa, grupo experimento apresentou idade média de 17,7 ± 0,67 meses. O grupo controle apresentou idade média de 15,2 ± 1,13 meses. O valor de t na comparação das médias das idades entre os dois grupos foi de 5,98 e p=0.0001. Os animais-controle pesaram em média 129,0 ± 18,8g e o experimento 145,0 ± 15,5g; t=1,88 e p=0,0514. Na microscopia óptica de luz e estudo morfométrico: avaliaram-se o diâmetro dos ácinos e epitélio acinar prostáticos, a apoptose, a expressão AgNORs e a celularidade. RESULTADOS: O grupo-experimento apresentou média de PSA de 0,003 ng/mL e o grupo-controle de 0,763 ng/mL, H=7,982 e p=0,0047. A área dos ácinos do grupo-experimento foi de 238,000±24,600 μm² versus 398,600±55,320 μm²; t= 2,653; p= 0,0122. A área do epitélio acinar no grupo-experimento foi de 111,900±12,820 μm² versus 160,400±18,430 μm² t= 2,162; p= 0,0361. A expressão de AgNORs foi menor no grupo-experimento 2,846±0,877 versus 3,68 ±1,07 grumos argilófilos por μm², p= < 0,0001. A apoptose foi mais freqüente no grupo-experimento, 53,62±1,389 versus controle, 14,76 ± 2,137, p= 0,0408. Não houve diferença na celularidade entre os grupos de animais, 74,75±5,5 células no grupo-controle versus 65,07±13,24, no grupo-experimento, p= 0,5105. CONCLUSÕES: A finasterida diminuiu o PSA sérico, a área do lúmen, o epitélio acinar, a expressão de AgNORs e promoveu a apoptose nos ácinos da próstata dos hamsteres experimento e não houve diferença na celularidade acinar entre os animais estudados.

Necrotic enterocolitis in pigs naturally infected by porcine circovirus type 2 / Enterocolite necrótica em suínos naturalmente infectados por circovírus suíno tipo 2

Samples of intestine with necrotic enteritis from 63 pigs naturally infected with porcine circovirus type 2 (PCV2) were studied. Colon was the main target of PCV2 associated necrotic enteritis in 60 cases. Immunohistological investigations were carried out to detect the presence of PCV2 in necrotic lesions and to identify the type of cells infected by the virus. Crypt epithelial cells had positive labelling for PCV2 in 17 cases. Depletion of goblet cells occurred in 10 cases. In 24 necrotic enteritis cases, co-infection of PCV2 and Salmonella was identified. An increased rate of apoptosis in the crypt epithelial cells of the large intestine from PCV2 of naturally infected pigs was observed. Immunohistochemical findings confirmed the presence of PCV2 within cells from necrotic intestinal tissue, suggesting that PCV2 may play a role in the development of those lesions. Diagnosis of necrotic enteritis associated with PCV2 should be based on the detection of PCV2 antigen or DNA in the necrotizing lesions. However, bacteriological examination should be performed to rule out the presence of bacterial agents, since co-infections are likely to occur in PCV2 affected pigs.

Foram selecionadas amostras intestinais com enterite necrótica de 63 suínos naturalmente infectados pelo circovírus suíno tipo 2 (PCV2). Enterite necrótica associada com PCV2 ocorreu principalmente no cólon, em 60 casos. Análise imuno-histoquímica foi realizada para identificar a presença de PCV2 em lesões necróticas e o tipo de células infectadas pelo vírus. Células epiteliais das criptas apresentaram marcação positiva para PCV2 em 17 casos. Depleção de células caliciformes ocorreu em 10 casos. Em 24 casos de enterite necrótica, observou-se co-infecção por PCV2 e Salmonella. Foi observado um aumento no índice de apoptose nas células das criptas do intestino grosso de suínos naturalmente infectados com PCV2. Os achados imuno-histoquímicos e histopatológicos sugerem que a infecção por PCV2 das células do tecido intestinal pode ocasionar enterite necrótica. O diagnóstico de enterite necrótica associada com PCV2 deve ser baseado na detecção do antígeno ou do DNA viral nas lesões necróticas. Contudo, análise bacteriológica deve ser realizada para descartar a presença de agente bacteriano, já que co-infecções são comuns.

Apoptosis in pulp elimination during physiological root resorption in human primary teeth

Pulp samples of 50 healthy human teeth with indication for extraction were examined to evaluate the role of apoptosis in pulp elimination during physiological root resorption. Two groups were formed: a test group (n=30) composed of pulp samples of primary teeth with physiological root resorption and a control group (n=20) composed of pulp samples of permanent maxillary third molars. Morphological evidence of apoptosis as well as in situ detection of cellular DNA fragmentation by TUNEL assay and detection of internucleosomal pattern of fragmentation of the genomic DNA by electrophoresis were observed. The apoptotic index of the primary tooth group was significantly higher than that of the permanent tooth group (51.01 ± 0.52 versus 25.32 ± 0.68) (p<0.001). TUNEL reaction showed intense and diffuse labeling in the pulp samples of primary teeth, which were discrete in the controls. Intense DNA internucleosomal fragmentation, a specific pattern for apoptosis, was observed in primary tooth pulps DNA by electrophoresis, in the permanent tooth pulps this pattern fragmentation of the genomic DNA for apoptosis were not present. These results seem to indicate a role of apoptosis in pulp elimination during the physiological root resorption of human primary teeth.

Cinqüenta amostras de polpas de dentes humanos hígidos com indicação para extração foram estudadas a fim de verificar a participação da apoptose na eliminação pulpar durante a reabsorção radicular fisiológica. As amostras foram divididas em 2 grupos: um grupo de estudo composto por 30 polpas de dentes decíduos hígidos com reabsorção radicular fisiológica, e um grupo controle composto por 20 polpas de terceiros molares superiores hígidos. Evidências morfológicas de apoptose, bem como detecção in situ da fragmentação do DNA genômico via reação de TUNEL e também a detecção do padrão internucleossômico de fragmentação do DNA genômico via eletroforese foram observados. O índice apoptótico foi maior no grupo de dentes decíduos (51,01 ± 0,52) quando comparado ao grupo de dentes permanentes (25,32 ± 0,68) (p<0,001). Quanto à reação de TUNEL, houve intensa marcação positiva para fragmentação do genoma no grupo de estudo, o que ocorreu de maneira discreta nos controle. A eletroforese do DNA genômico mostrou fragmentação internucleossômica, em um padrão específico de apoptose nas amostras de dentes decíduos o que não ocorreu no grupo de dentes permanentes. Estes achados parecem indicar a apoptose como um mecanismo importante na eliminação do tecido pulpar durante a reabsorção radicular fisiológica de dentes decíduos humanos.

Epidemiological and clinical aspects of equine Herpesvirus encephalitis infection in horses that died with neurological signs from Minas Gerais state, Brazil / Aspectos epidemiológicos e clínicos da infecção neurológica associada ao herpesvírus eqüino 1 (ehv-1) em cavalos que morreram com sinais nervosos no Estado de Minas Gerais, Brasil

During the period of October 2004 until February 2006, 75 samples of central nervous system (CNS) obtained from horses that died with neurological signs in the state of Minas Gerais were sent to the Laboratory of Compared Virology in ICB/UFMG for diagnosis of equine herpesviruses. All samples were previously diagnosticated negative for rabies virus by the Laboratório de Saúde Animal of the Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA). Among the analyzed samples, 39 (52%) were positive for the equine herpesvirus 1(EHV-1) through the polymerase chain reaction assay (PCR). In most cases, the histopathological examination of the CNS revealed a mild vasculitis with perivascular mononuclear cuffing, congestion, arterial thrombosis and degeneration of nervous tissue. The positive CNS samples for EHV-1 were obtained from horses. sampled from 30 municipalities of Minas Gerais state. The cases occurred in an isolated form in different periods of the year, not presenting a seasonal character. The clinical course duration was acute, varying between one and four days. The most frequently observed neurological signs were ataxia, unsteadiness in the hind limb, paralysis of hind limbs and recumbency. According to information provided by IMA, the infections caused by EHV-1 were as frequent as the ones caused by rabies virus in horses of Minas Gerais state during the studied period. Hence, it became important to include EHV-1 encephalitis in the differential diagnosis from other diseases of the central nervous system in horses of Minas Gerais state.

Durante o período de Outubro de 2004 a Fevereiro de 2006, 75 amostras de sistema nervoso central (SNC) oriundas de eqüinos que morreram com sinais neurológicos no estado de Minas Gerais foram enviadas ao Laboratório de Virologia Comparada no ICB/UFMG para o diagnóstico de herpesvírus eqüino. Essas amostras foram previamente diagnosticadas negativas para o vírus da raiva através dos testes de imunofluorescência direta e inoculação em camundongos,no Laboratório de Saúde Animal (LSA) do Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA). Dentre as amostras analisadas, 39 (52%) foram positivas para o herpesvírus eqüino 1 (EHV-1) através da técnica de reação em cadeia pela polimerase (PCR). Na maioria dos casos, o exame histopatológico do SNC revelou uma discreta vasculite com infiltrado perivascular de células mononucleares, congestão, trombose arterial e degeneração do tecido nervoso central. As amostras de SNC positivas para o EHV-1 foram coletadas de eqüinos oriundos de 30 municípios de Minas Gerais. Os casos de EHV-1 ocorreram de forma isolada não apresentando caráter sazonal. Na maioria dos casos(71,8%), a evolução dos sinais clínicos foi aguda, sendo que os sinais clínicos observados com mais freqüência foram ataxia, instabilidade dos membros posteriores, paralisia dos membros posteriores e decúbito. De acordo com informações relatadas pelo IMA, as infecções causadas pelo EHV-1 foram tão freqüentes como as infecções causadas pelo vírus da raiva em eqüinos no estado de Minas Gerais durante o período estudado. Portanto, torna-se importante a inclusão da encefalite pelo EHV-1 no diagnóstico diferencial de outras doenças do SNC de eqüinos no estado de Minas Gerais.

Modelos experimentais de indução à tendinose por esforço repetitivo: revisão de literatura / Repetitive efforts induction experimental models of tendinosis: literature review

Objetivo: Revisar os modelos experimentais que buscaram induzir a tendinose em animais através de esforços repetitivos (overuse). Materiais e métodos: Foi realizada uma busca exaustiva e sistematizada no Pubmed/Medline, Cochrane/Bireme e PEDro limitada ao período de 01/01/1950 à 15/03/2007, no idioma inglês, em experimento animal e utilizando associações das palavras-chaves: tendinopaty, animal, tendon e overuse injury. Resultados: Nove artigos foram encontrados, sendo que quatro utilizaram modelos de indução através de contração ativa. Discussão: Os modelos que utilizaram contração induzida por eletro-estimulação apresentaram pouca similaridade à evolução da tendinose em humanos, uma vez que os animais estavam sob anestesia e todo o metabolismo se encontrava alterado. Por outro lado, os modelos que utilizaram contração ativa se assemelhavam, com maior fidedignidade, ao que realmente acontece no desenvolvimento clínico da tendinose, principalmente naqueles em que o tendão tem participação ativa durante a atividade imposta. Conclusão: Muito ainda falta para termos modelos experimentais padronizados e sistematizados para os diversos tendões. Futuros modelos devem levar em consideração à especificidade de cada tendão e procurar induzir a lesão da maneira similar ao que acontece em humanos.

The effect of finasteride on spermatogenesis of Mesocricetus auratus / Impacto da finasterida na espermatogênese do Mesocricetus auratus

PURPOSE: To study the effect of finasteride on the spermatogenesis of adult Mesocricetus auratus. METHODS: Twenty adult hamsters were evaluated. The animals were one year-older, and were randomly divided in 2 different groups: control group with ten animals (n=10) and experimental group also with ten animals (n=10). The animals in the experimental group were shot 7.14 ng/mL (0.5mL) of finasteride by 100mg/Kg, subcutaneously in the dorsal region three times per week during 90 days. This dose correspondes to 5mg of the drug used in adult men for the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH). After three months, the animals were anesthetized through association of 200mg/kg ketamine chloridrate and 2.5 mg/kg of diazepan and were dead through hypovolemia.. The testis removed along with the whole genitourinary apparel were fixed with 10 percent formalin and submitted to histological analisys by optical microscopy. The hematoxilin-eosin (HE) method was used to stain the slides. RESULTS: The mean weight of animals in the control group before death was 129.0±18.8gr. The mean weight of animals in experimental group was 145.0±15.25gr. The mean age of animals in control group before death was 15.2±1.13 months. The mean age of animals in experimental group before death was 17.16±0.82 months. The mean difference in weight between both groups was not statistical significant (p=0.0514). The totality of animals in control group (100 percent) presented no tubular alterations and showed no disturbancy in the spermatogenesis stages. Four animals (40 percent) in the experimental group showed hypotrophy of the seminiferous tubules and six (60 percent) showed normal spermatogenesis, however reduced compared to control group. There was statiscally significant difference (p=0.043) between the control and experimental group related to testicular alterations. CONCLUSION: The animals that were administered finasteride showed significant...

OBJETIVO: Estudar o impacto da finasterida na espermatogênese do Mesocricetus auratus, adulto. MÉTODOS: Foram avaliados 20 hamsters adultos, com idades superiores a 1 ano, distribuídos em dois grupos: grupo controle com dez animais (n=10) e grupo experimental também com dez animais (n=10). No grupo experimental foi aplicado 7,14ng/mL (0,5mL) de finasterida por 100mg/Kg/peso, subcutâneo (SC), na região dorsal do animal, três vezes por semana por 90 dias, dose correspondente a 5mg da droga usada em homens adultos, para tratamento da hiperplasia benigna da próstata (HBP). No final de três meses, esses Hamsters foram mortos por hipovolemia, após serem anestesiados com cloridrato de quetamina, na dosagem de 200 mg/kg juntamente com diazepam, na dosagem de 2,5 mg/kg. Os testículos foram retirados em monobloco juntamente com todo o aparelho geniturinário, fixados em formalina a 10 por cento e encaminhados à histotécnica para posterior análise histológica em microscópico óptico. Foram usadas para coloração das lâminas a hematoxilina e eosina (HE). RESULTADOS: Quando foram mortos, os Hamsters do grupo de controle pesaram em média 129,0g e desvio padrão (DP) de 18,8g. O grupo de experimento apresentou média de peso de 145,0g e DP de 15,25g. A idade dos animas de controle quando foram mortos apresentou média de 15,2 meses e DP de 1,13 meses. Os animais de experimento apresentaram média de idade de 17,16 meses e DP de 0,82. A diferença das médias de peso entre os dois grupos não teve significado estatístico (p=0,0514). Os animais (100 por cento) do grupo controle não tiveram alterações tubulares e apresentaram todas as etapas da espermatogênese normais. Quatro animais (40 por cento) do grupo de experimento apresentaram hipotrofia dos túbulos seminíferos, e seis (60 por cento) desses animais apresentaram espermatogênese normal, mas diminuída em relação ao grupo controle. Do ponto de vista estatístico houve significância (p=0,043) entre o grupo de...

Inibição de apoptose e retardo da maturação planetária: um provável mecanismo da retenção planetária na brucelose bovina (revisão de literatura) / Apoptosis inhibition and delay of placental maturation: a proposed mechanism of placental retainment in bovine vrucellosis (review)

A brucelose é uma doença de grande importância em saúde pública, causa grande perda de produtividade em rebanhos bovinos, além de prejuízos em decorrência das barreiras sanitárias no mercado internacional. No bovino, a brucelose induz aborto, mortalidade neonatal, placentite necrotizante e retenção de placenta. Como tecidos em necrose usualmente são friáveis, seria esperado que a placenta se desprendesse mais rapidamente e não ficasse retida em decorrência da placentite necrotizante na brucelose. Há evidências de que bactérias do gênero Brucella inibem a apoptose ao infectar determinados tipos celulares. A Brucella abortus tem a habilidade de infectar e se multiplicar no trofoblasto. A expulsão adequada da placenta no momento do parto depende da maturação deste órgão, que decorre da diminuição da celularidade e da ocorrência de apoptose nos tecidos fetal e materno. Propõe-se aqui que a Brucella abortus, direta ou indiretamente, iniba a apoptose de células placentárias e, conseqüentemente, retarde a maturação placentária. Esse fato poderia explicar melhor a retenção placentária que se desenvolve na brucelose bovina.

O tumor venéreo transmissível canino. Aspectos gerais e abordagens moleculares (revisão de literatura) / The vanine transmissible venereal tumor. General aspects and molecular approach (review)

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é uma neoplasia indiferenciada de células redondas cujo crescimento é rápido. Em animais adultos e saudáveis o tumor tende a regredir espontaneamente. Em animais jovens ou imunossuprimidos essa neoplasia pode metastatizar para outros órgãos. Uma característica marcante desse tumor é o dato dele ser de fácil transplantação e rápido crescimento propiciando a oportunidade de utilização de marcadores de proliferação celular e estudo da cinética tumoral. Sua regressão espontânea abre uma perspectiva para o estudo da morte celular por apoptose. Além disso, o TVTC, é um excelente modelo para o estudo da interação entre a imunidade do hospedeiro e o crescimento tumoral.

Estudo comparativo experimental de compósito bioativo de matriz polimérica para aplicação em cirurgia plástica ocular na substituição tecidual / Experimental comparative study of bioactive composite with polymeric matrix for applications to oculoplastic surgery for tissue replacement

OBJETIVO: Comparar dois novos biomateriais: compósito a 10 por cento (Escola de Engenharia da Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG - Brasil) e compósito a 20 por cento (Escola de Engenharia da Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG - Brasil), a dois materiais controles: Medpor® (Porex Surgical Inc. - EUA) e Polipore® (Homus Com. Ind. Ltda - Brasil). MÉTODOS: Estudo experimental randomizado duplo cego: em 28 coelhos, 56 implantes foram colocados por via transconjuntival após a remoção de fragmento de cartilagem da reborda orbitária superior de ambas as órbitas, formando-se 4 grupos: Grupo I: Compósito a 10 por cento/Medpor®; Grupo II: Compósito a 10 por cento/Polipore®; Grupo III: Compósito a 20 por cento/Medpor®; Grupo IV: Compósito a 20 por cento/Polipore®. Após permanência média de 19,7 semanas, o material explantado foi avaliado histomorfometricamente em microscopia óptica, e o estudo estatístico foi feito pelo teste t de Student. RESULTADOS: Nenhum implante sofreu extrusão, ocorrendo uma única exposição (Compósito a 20 por cento). Comprovado similar biocompatibilidade dos materiais nos quatro grupos. A histomorfometria no entanto revelou nos compósitos a presença estatisticamente significativa de pseudocápsula mais espessa, com aumento do número de fibroblastos, maior quantidade de colágeno e neovasos, e menor número de células inflamatórias. Foi possível detectar na interface implante-tecido nos compósitos, a presença de camada de hidroxiapatita carbonatada, funcionando como cola biológica. A integração tecidual dos implantes através dos poros foi maior nos controles que nos compósitos. CONCLUSAO: Os compósitos foram aprovados quanto a biocompatibilidade, e apresentaram adicionalmente algumas vantagens sobre o Medpor® e o Polipore®.

Efeito da mitomicina C na secreção de fator estimulador de granulócitos macrófagos e interleucina-5 em cultura de estroma de pólipos nasais eosinofílicos / Effect of mitomycin C on the secretion of granulocyte macrophages colonies stimulating factor and interleukin-5 in eosinophilic nasal polyps stromal culture

O estudo de fatores teciduais, como a concentração de fator estimulador de colônias de macrófagos (GM-CSF) e interleucina 5 (IL-5), aponta para os mecanismos envolvidos na manutenção da eosinofilia em pólipos nasossinusais eosinofílicos. A mitomicina C (MMC) tem sido utilizada com bons resultados em otorrinolaringologia. OBJETIVO: Este estudo teve como objetivo avaliar a ação da Mitomicina C sobre a secreção de GM-CSF e IL-5 em pólipos eosinofílicos. FORMA DE ESTUDO: caso-controle. MATERIAL E MÉTODO: O estudo foi comparativo experimental autopareado, com amostras de pólipos biopsiados de pacientes portadores de polipose nasossinusal eosinofílica. Os fragmentos semeados como grupo experimental receberam mitomicina C por 5 minutos na dosagem de 400microg/ml e então lavadas em meio RPMI. Nos tempos zero, 12 e 24 horas, o sobrenadante foi retirado para determinação dos níveis de GM-CSF em 22 pacientes e IL-5, em 19 pacientes, utilizando o método de ELISA. RESULTO: Diminuição de secreção de GM-CSF nos grupos tratados com mitomicina C no tempo 24h (p<= 0,05); no grupo tratado houve expressão significativa de GM-CSF entre zero e 12 horas (p=0,013) demonstrando a viabilidade da cultura igualmente ao grupo não tratado; tendência à queda dos níveis de IL-5 no grupo tratado em 24h. CONCLUSÃO: O estudo demonstrou que a mitomicina C foi capaz de inibir a síntese de GM-CSF em culturas de pólipos nasais eosinofílicos e com provável ação sobre a secreção de IL-5, necessitando de estudos complementares.

As encefalopatias espongiformes e o enígma dos prions / Spongiform encephalopathies and the enigma of prions

Um dos mais intrigantes enigmas da medicina e veterinária moderna é o agente causador das encefalopatias espongiformes, como a "Doença da vaca louca", a "Scrapie", a "Kuru", a "Doença de Creutzfeldt-Jakob" e a Síndrome de Gerstmann-Straussler-Schinker". Uma forma anormal de uma proteína cerebral abundante chamada Prion (PrP) é considerada como o agente etiológico, capaz de transmitir as doencas. Essa forma alterada aparentemente modifica as PrP's normais para a configuração anormal, criando uma corrente de amplificação que determinará mais tardiamente a doença. Nessa revisão discutem-se algumas das mais intrigantes propriedades moleculares das formas normais e alteradas das PrP's, de maneira a esclarecer melhor aos colegas veterinários a patogenia dessas doenças

Apoptose ou morte celular programada: um novo conceito em patologia? / Apoptosis or programmed cel death: a new concept in pathology?

A apoptose pode ser considerada como um tipo novo e fascinante de morte celular, e está envolvida em diversos fenômenos fisiológicos e patológicos. O objetivo da presente revisäo é atualizar os conceitos mais recentes de morte celular, sumariando-os e dando-se ênfase à apoptose e à sua diferenciaçäo com a necrose. O papel da apoptose na maturaçäo do sistema imunológico, seu desenvolvimento no desenvolvimento de auto-imunidade e de doenças imunossupressivas, assim como sua possível conexäo no processo de oncogênese recebem atençäo especial nesse enfoque.